JURNAL PRAKTIKUM KIMIA ORGANIK I PERCOBAAN 8 : KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS DAN KOLOM

JURNAL PRAKTIKUM 

KIMIA ORGANIK I

 

DISUSUN OLEH :

NAMA : CICI INDAH SEPTIANA

NIM : A1C118069

KELAS : REGULER A 2018

DOSEN PENGAMPU :

Dr. Drs. SYAMSURIZAL, M.Si

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA

JURUSAN PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS JAMBI

2020 

PERCOBAAN 8

I.               Judul : Kromatografi Lapis Tipis dan Kolom

II.             Hari/Tanggal : Rabu, 29 April 2020

III.           Tujuan : Adapun tujuan dilakukannya praktikum ini adalah sebagai berikut:

1.     Dapat mengetahui teknik-teknik kromatografi lapis tipis dan kolom.

2.     Dapat membuat plat kromatografi lapis tipis dan kolom kromatografi.

3.     Dapat memisahkan suatu senyawa dari campurannya dari kromatografi lapis tipis dan memurnikannya dengan kolom.

4.     Dapat memisahkan pigmen tumbuhan dengan cara kromatografi kolom.

IV.           Landasan Teori

Teknik kromatografi dapat memisahkan campuran senyawa menjadi komponennya dengan bergantung pada pendistribusian zat anatara dua fase, fase diam dan fase gerak, fase diam disebut juga dengan stasioner dan fase bergerak disebut juga dengan mobile. Pernyataan yang harus diperhatikan dari kromatografi adalah bahwa senyawa yang tidak sama maka akan mempunyai koefisien distribusi yang tidak sama pula pada fase diam dan fase bergeraknya.

Dalam Kromatografi Lapis Tipis digunakan bahan penjerap yang dilekatkan tersebar pada plat kaca, alumunium, ataupun plastic. Teknik Kromatografi Lapis Tipis ini mempunyai kelebihan pada proses pengerjaan lebih cepat dan pemisahannya tergolong kategori yang baik digunakan (Tim Kimia Organik I, 2020).

      Salah satu metode yang sering digunakan dalam Kimia Organik adalah metode Kromatografi. Metode ini tentunya digunakan untuk memisahkan suatu zat yang saling bercampur menjadi komponen-komoponen penyusunnya. Komponen-komponen inilah yang nantunya akan dianalisis. Kromatografi diciptakan dengan berbagai jenis, diantaranya adalah kromatografi lapis tipis, kromatografi gas, kromatografi penukar ion, kromatografi cair, dan kromatografi afinitas. Tentunya kromatografi dengan berbagai jenis ini digunakan sesuai dengan kebutuhannya. Walaupun berbeda jenisnya namun semuanya mempunyai prinsip dasar atau landasan yang sama (http://syamsurizal.staff.unja.ac.id/2019/04/10/325teknik-pemisahan-dengan-khromatografi/)

      Teknik romatografi lapis tipis hampir sama saja dengan teknik kromatografi kertas, yang menjadi pembedanya adalah media yang digunakan untuk pemisahnya atau dapat dilihat pada fase diamnya. Bahan adsorben yang digunakan untuk fasa diam ada berupa silica gel, alumunium dan serbukselulosa. Partikel yang ada pada silica gel nantinya akan membentuk ikatan hydrogen dengan molekul polar air, hal ini dikarenakan silica gel mengandung gugus hidroksil di permukaannya (Rudi, 2010).

      Kromatografi lapis tipis merupakan bentuk dari kromatografi planar. kromatografi jenis ini fase diamnya merupakan lapisan yang seragam atau sama (uniform) pada permukaan bidang datar yang mana hal ini didorong dengan lempeng kaca, pelat alumunium, ataupun pelat plastik (Rohman, 2007). 

V. Alat dan Bahan

5.1. Alat

1.      Pelat kaca

      2.      Kain kering

      3.      Oven

      4.      Kaca besar

      5.      Gelas piala

      6.      Batang pengaduk

      7.      Cawan petri

      8.      Tabung reaksi kecil

      9.      Pipa gelas kapiler

      10.  Pelat TLC

      11.  Bejana pengembang

       

5.2  Bahan

1.     Air

2.       Metanol

3.     Pita selotip

4.      Silika gel

5.     Asam asetat

6.     Eter

7.       Benzen

8.       Kertas saring

9.       Tablet mengandung kafein

10.      Kafein standar

11.      Kristal iod

12.      Daun

13.      Petrolium eter

14.      Kristal Na-sulfat anhidrat

15.      Gelas wool

16.    Suspensi selulosa                       

17.      Kalsium karbonat

18.      Suspensi sukrosa

19.      Aseton

VI. Prosedur Kerja
6. 1 Kromatografi Lapis Tipis

a.    Dibersihkan pelat kaca kecil dengan air,methanol, lap dengan menggunakan kertas atau kain lalu dikeringkan dengan  oven

b.   Disusun 5 pelat diatas sebuah kaca besar, direkatkan kedua sisi deretan pelat kecil dengan pita selotip

c.  Disiapkan suspensi silica gel dengan dicampurkan 5gr bahan dan 10ml methanol/air suling dalam gelas piala tertutup. Sebarkan suspensi diatas pelat dan ratakan suspense  keseluruh permukaan kaca dengan batang pengaduk,lalu dikeringkan didalam oven 120°C selama 10 menit

d.   Dibuatlah larutan pengembang dengan komposisi methanol : asam asetat : eter : benzene (0,10 : 1 : 3 : 5,9)ml dalam gelas piala ukuran 100ml dilapisi dinding dalamnya dengan kertas saring, ditutup gelas piala dengan cawan petri

e.      Digerus 2 buah tablet yang mengandung kafein dan diekstraksi dengan 5ml methanol.

f.     Dilarutkan 50mg kafein standar dalam 1ml methanol didalam tabung reaksi kecil

g.    Diambil cairan menggunakan pipa gelas kapiler, lalu bubuhkan diatas pelat TLC kecil dengan jarak 1cm satu sama lain dan 1cm dari tepi pelat kaca, dikeringkan noda sampel dan standar dengan di tiup,lalu dibubuhkan 3-5kali dan setiap kali dikeringkan

h.  Dimasukkan pelat kebejana pengembang, perhatikan supaya noda tidak terendam. Di biarkan hingga garis pelarut dapat mencapai sekitar 1cm dari tepi atasnya pelat

i.      Diangkat pelat di tandai garis depan pelarut lalu dikeringkan

j.     Dimasukkan pelat ke gelas piala yang telah diisi dengan butiran Kristal iod,  ditunggu hingga nampak noda

k.     Diangkat pelat dan dilingkarkan noda

l.       Dihitung dan bandingkan semua Rf

 6. 2 Kromatografi Kolom

a.    Dilumatkan 10 lembar daun dengan memakai lumping, direndamlah selama 1jam dengan perendamnya itu campuran dari 90ml PE (td 60-90°C), 10ml benzene serta 30ml methanol.disaring kemudian diekstraksi sebanyk 4x dengan air 50ml, dipisahkan lapisan organic. Dikeringkan dengan Kristal Na-sulfat anhidrat. Kemudian disaring kembali. Gunakan rovator untuk mempekatkan lapisan organic hingga cairan tinggal beberapa ml.

b.      Disiapkan kolom kromatografi dengan pipet tetes. Disumbat bagian bawah kolom dengan gelas wool. Lalu dimasukkan suspense selulosa (dari0,5gr selulosa dalam 10ml pelarut PE) hingga 3-4cm. kemudian dimasukkan lagi suspense CaCO₃ (1gr CaCO₃ dalam 10ml PE)hingga 3-4cm. pelarut harus diberikan terus hingga timbunan tenyerap menjadi kering dan udaranya masuk. Diletakkan kertas saring diatas dan diantara timbunan penyerap

c.       Dimasukkan larutan sampel setinggi 1cm. jikalau permukaan sampelnya telah mendekati permukaan penjerap cepat dibilas dengan PE:aseton(6:1) bagian dalam kolomnya. Terus lakukan penetesan pelarut ke dalam kolom. Dihentikan pemberian pelarutnya jika warna telah keluar dari kolom.

Untuk melihat video praktikum tentang materi ini, dapat dilihat pada link video dibawah ini :

https://youtu.be/T30r9xdsJLA

Dari video diatas, ada beberapa permasalahan yang ditemukan, yaitu :

1. Pada tahap penyiapan Chamber untuk penjenuhan, mulut chamber dioleskan terlebih dahulu, apa kandungan kimia yang terdapat dalam bahan olesan itu? dan apa tujuan dilakukannya pengolesan tersebut?

2.Mengapa eluen yang digunakan harus dijenuhkan terlebih dahulu? bagaimana jika eluen yang digunakan tidak dalam keadaan jenuh?

3. Bagaimana jika eluen yang digunakan bukan kloroform dan etanol? Bahan apa saja yang dapat menggantikannya? 

Jika teman-teman ada yang mengetahui jawabannya, silahkan tulis di kolom komentar yaa...